当保罗和巴拿巴准备出发进行第二次宣教旅行时，他们在是否要带约翰马可一同上路的事上产生了分歧。结果是二人分道扬镳；巴拿巴和约翰马可走一条路，保罗和西拉走另一条路。提摩太在路司得加入了保罗一行。途经特罗亚的时候他们又带上了路加，即《使徒行传》的作者。